Временные методические указания по определению набу в эфирных маслах методом тонкослойной хроматографии

Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6110-91

(В дополнение к N 3880-85)

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика препарата

1.1. Химическое название: 3-гидроокси-5-(2-этилтиопропил)-2-/1-(этоксиимино)бутил/-циклогексен-2-он-1.

Структурная формула:

                          /NOC H
                         C/   2 5
                        / \
              OH       /   C H
                \_____/     3 7                 C  H  NO .
                //   \\=O                        17 29  2
                \ ___ /
    C H S       / ---                           М.м. 327,5 г/моль.
     2 5 \CH-CH
         /     2
      CH
        3

    1.2. Синонимы: сетоксидим, поаст.
    1.3.   В   чистом   виде   маслянистая  жидкость  без  запаха,
                                             -2
температура  кипения  90  °C  при  5,3  x  10    Па,  растворим  в
органических  растворителях, растворимость в воде 25,0 мг/л при 25
°C  и  pH 4. Устойчив в щелочных средах. ЛД   для крыс 3200 - 3500
                                           50
мг/кг. Рекомендуется для борьбы с сорняками на розе, мяте, шалфее,
лаванде.

2. Методика определения набу в эфирных маслах методом тонкослойной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении набу из растворов эфирных масел в н-гексане ацетонитрилом, промывке экстракта смесью растворителей н-гексан - диэтиловый эфир, реэкстракции из разбавленного ацетонитрильного раствора в диэтиловый эфир и определении методом тонкослойной хроматографии на пластинках "Силуфол".

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Минимально определяемое количество набу: 1 мкг.

Нижний предел определения в эфирном масле: 0,1 мг/кг.

Среднее значение определения при n = 5, a = 0,95: 65,3%.

Стандартное отклонение: +/- 3,4%.

Доверительный интервал среднего при n = 5, a = 0,95: +/- 8,5%.

Размах варьирования: 53,7 - 87,9%.

2.1.3. Избирательность метода

Метод селективен в присутствии хлор- и фосфороорганических пестицидов, определению не мешают фенилзамещенные мочевины, нитрофениловые эфиры.

2.2. Реактивы и растворы

    Гексан, ТУ 6-09-3375-78, ч, CH (CH ) CH .
                                  3   2 4  3
    Ацетонитрил, МРТУ 6-09-3534-74, ч, CH CN.
                                         3
    Натрий сернокислый безводный, ГОСТ 4166-76, хч, Na SO .
                                                      2  4
    Диэтиловый эфир, ГОСТ 6262-79, ч, (C P ) O.
                                        2 5 2
    Бромфеноловый синий, ТУ 6-09-1058-76, ч.
    Лимонная кислота, ГОСТ 3652-69, чда.
    Ацетон, ГОСТ 2603-79, хч, (CH ) CO.
                                 3 2
    Толуол, ГОСТ 5789-69, чда, C H CH .
                                6 9  3
    Серебро азотнокислое, ГОСТ 1277-75, хч, AgNO .
                                                3
    Этилацетат, ТУ 6-09-6515-70, хч.

Стандартные растворы набу в ацетоне с содержанием 1 мкг/мл и 10 мкг/мл.

Для приготовления стандартного раствора взвешивают на аналитических весах навеску набу 10 мг +/- 0,62 мг, помещают в мерную колбу емкостью 100 мл. Навеску растворяют в 10 - 15 мл ацетона и доводят до метки тем же растворителем. Раствор содержит 100 мкг/мл набу. Из раствора пипеткой переносят в две мерные колбы на 100 мл 10 мл и 1 мл раствора соответственно и доводят до метки ацетоном. Растворы содержат 10 мкг/мл и 1 мкг/мл набу соответственно. Растворы стабильны при хранении в холодильнике не более месяца, т.к. при более длительном хранении на хроматографической пластинке образуются дополнительно еще два пятна.

Проявляющие реактивы.

1. Водный раствор азотнокислого серебра с массовой долей 2%; 2. Ацетоновый раствор бромфенолового синего с массовой долей 0,4%; 3. Водный раствор лимонной кислоты с массовой долей 2%.

2.3. Приборы и посуда

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.

Воронка ВД-2-500-29/32, хс, ГОСТ 25336-82.

Воронки химические типа В, ГОСТ 25336-82.

Колбы плоскодонные типа КНКШ, ГОСТ 25336-82.

Колбы Кьельдаля 1-250-29/32 ТС, ГОСТ 25336-82.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, на 100 мл и 1000 мл.

Пипетки, ГОСТ 1770-74, на 1 и 10 мл.

Цилиндр мерный 1-100, ГОСТ 1770-74.

Микрошприц МШ-10М, ТУ 2-833-106.

Камера для хроматографирования, ГОСТ 25336-82.

Камера для опрыскивания, ТУ 25-11-430-70.

Весы ВЛР-200, ГОСТ 24104-80, 2-й класс.

Весы ВЛК-500, ГОСТ 24104-80.

Гири Г-2-210, ГОСТ 7328-82.

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 25336-82.

Пластинки "Силуфол", производство ЧССР.

Пластинки для ВЭТСХ.

Допускается применение аппаратуры и посуды с аналогичными техническими и метрологическими характеристиками не ниже указанных в стандарте.

2.4. Подготовка к определению

2.4.1. Отбор, хранение и доставка проб

Отбор, хранение и доставку проб проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР N 2051-79 от 21.08.1979. Для анализа отбирают среднюю пробу эфирного масла 10 г.

2.4.2. Подготовка и очистка реактивов

Органические растворители перед началом работы очистить по соответствующим методикам и перегнать (2), сульфат натрия прокалить при 300 - 400 °C. Пластинки для ТСХ и "Силуфол" активировать в термостате при 100 °C в течение 1 часа или под УФ-лампой в течение 10 мин.

2.5. Проведение определения

Навеску массой 10 г с записью результатов взвешивания до первого десятичного знака, берут на технических весах 10 г эфирного масла мяты, лаванды, розы, шалфея, помещают в делительную воронку на 250 мл с 50 мл н-гексана, выдерживают 10 мин. Прибавляют 50 мл ацетонитрила, встряхивают и отбрасывают верхний слой. Оставшийся раствор промывают смесью растворителей: н-гексан - диэтиловый эфир (7:1), 3 x 50 мл, отбрасывая верхний слой. В делительную воронку на 500 мл помещают 200 мл 10-процентного сульфата натрия и переносят оставшийся после промывки раствор. Реэкстрагируют набу диэтиловым эфиром, 3 x 50 мл, собирая верхний слой и пропуская его через 50 г безводного сульфата натрия. Объединенные экстракты концентрируют досуха на ротационном испарителе при температуре бани не выше 40 °C. К сухому остатку добавляют 0,5 мл н-гексана и микрошприцем наносят пробу на хроматограмму.

2.5.2. Хроматография в тонком слое сорбента

    Анализируемую     пробу     количественно     переносят     на
хроматографические  пластинки "Силуфол" или для ТСХ, рядом наносят
стандартные  растворы  набу  (3 - 7 - 15 мкг).   Затем   пластинки
помещают в хроматографическую   камеру, предварительно  насыщенную
подвижной фазой.  В качестве основной подвижной  фазы используется
смесь ацетон - гексан - этилацетат (22,6:66,6:11,2). R  =  0,46. С
                                                      f
целью  увеличения  надежности   идентификации   набу  предлагается
использовать   альтернативные   фазы:   ацетон - гексан - уксусная
кислота (19,5:20,0:0,5), R  = 0,30, ацетон - толуол (5 - 95), R  =
                          f                                    f
0,30.

После поднятия фронта подвижной фазы до 10 см пластинку из камеры извлекают, высушивают на воздухе до полного удаления растворителей.

Обрабатывают проявляющим раствором N 1, затем N 2. Набу проявляется в виде темно-синего пятна на светло-желтом фоне.

2.6. Обработка результатов

Содержание набу в анализируемой пробе вычисляют по формуле:

                                A x K
                            X = -----,
                                  P

где:

A - количество препарата, найденное на хроматограмме при сравнении со стандартом, мкг;

P - навеска, мл;

X - содержание набу в пробе, мг/л;

K - поправочный коэффициент, учитывающий потери набу в процессе анализа (K = 165). Содержание микроколичеств набу в пробе вычисляют как среднее трех параллельных определений.

3. Техника безопасности

При выполнении операций по определению набу в эфирных маслах следует руководствоваться требованиями при работе с соединениями третьего класса токсичности и легколетучими растворителями.

Комментарии
Комментирование через социальные сервисы Facebook и Вконтакте: