Временные методические указания по определению остаточных количеств 2-метил-4-диметиламинометилбензимидазол-5-ол-дигидрохлорида в воде, почве, зерне и зеленой массе кукурузы методом тонкослойной хроматографии

Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6264-91

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика препарата

Торговое название: Амбиол.

Производитель: Россия.

Действующее вещество: 2-метил-4-диметиламинометилбензимидазол-5-ол-дигидрохлорид.

Структурная формула:

         N(CH )
         ¦   3 2
         ¦
         CH    N
    HO   /\2  /¦¦
      \ // \ / /\
       ¦   ¦¦  N \    x 2HCl
       ¦   ¦¦--H  CH
        \\ /        3
         \/

    Эмпирическая формула C  H  N O.
                          11 15 3

Молекулярная масса 278,18.

Физико-химические свойства: белое кристаллическое вещество с Т пл. 221 - 226 °C.

Растворим в воде, этиловом спирте. Основание растворимо в хлороформе, этиловом спирте.

МДУ в продуктах питания - не допускается.

ОДУ в воде водоемов - 0,03 мг/куб. дм, ОДК в почве - 0,03 мг/кг.

Применяется в качестве регулятора роста растений в посевах кукурузы.

2. Методика определения амбиола в воде, почве, зерне и зеленой массе кукурузы тонкослойной хроматографией

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении амбиола из объектов смесью этилового спирта с аммиаком в соотношении 50:2, экстракции хлороформом из водного раствора коэкстрактивных веществ при pH <= 1, препарата - при pH >= 10 и определении хроматографией в тонком слое на пластинках "Силуфол" в подвижной фазе этиловый спирт: аммиак в соотношении 30:2 с обнаружением зон локализации обработкой 0,5-процентным водным раствором нитрита натрия.

2.1.2. Избирательность метода

Метод селективен. Определению не мешают хлорорганические и фосфорорганические пестициды.

Метрологическая характеристика метода приведена в таблице.

Таблица

2.2. Реактивы и растворы

Ацетон чда, ГОСТ 2603-79.

Спирт этиловый технический, ГОСТ 18300-72, свежеперегнанный.

Хлороформ чда, ГОСТ 20015-74, свежеперегнанный.

Кислота соляная ч, ГОСТ 3118-77.

Аммиак водный, ГОСТ 3760-79.

Натрий сернокислый безводный хч, ГОСТ 4166-76.

Натрий уксуснокислый 3-водный, ТУ 199-78.

Натрий азотистокислый хч, ГОСТ 4197-74.

Натрий хлористый чда, ГОСТ 4233-77.

Проявляющий реактив - 0,5-процентный водный раствор азотистокислого натрия.

Пластинки "Силуфол" производства фирмы "Хемапол", ЧССР размером 150 x 150 мм.

2.3. Приборы и посуда

Сосуды СЦ-3, ГОСТ 25336-32Е.

Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-74, или аналогичные.

Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73, или аналогичный.

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76, или аналогичный с набором колб.

Воронки делительные, ГОСТ 10054-82, вместимостью 300 мл.

Колбы плоскодонные, ГОСТ 9737-70, вместимостью 250 мл.

Колбы Эрленмейера, ГОСТ 9737-70, вместимостью 250 мл.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 25 мл.

Пипетки с делениями, ГОСТ 20292-74, вместимостью 10, 5, 1 мл.

Пробирки градуированные с пробками на шлифах, ТУ 1770-74Е.

Мельница лабораторная (кофемолка).

Сушильный шкаф.

2.4. Отбор проб

Отбор проб проводится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными 21.08.1979 N 2051-79.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Подготовка хроматографической камеры

Хроматографические камеры за 1 час до начала хроматографирования заполняют подвижными фазами: первую - ацетоном, вторую, стенки которой обложены фильтровальной бумагой, - смесью этиловый спирт:аммиак в соотношении 30:2. Объем подвижной фазы в камере должен находиться на высоте не выше чем 0,7 - 1,0 см от уровня дна камеры.

2.5.2. Приготовление стандартных растворов

Стандартный раствор N 1 амбиола концентрации 1 мг/мл готовят растворением навески 0,0250 г в 25 мл этилового спирта в мерной колбе.

Стандартный раствор N 2 амбиола концентрации 0,1 мг/мл готовят разбавлением 5 мл стандартного раствора N 1 до 50 мл этиловым спиртом в мерной колбе.

2.6. Проведение определения

2.6.1. Экстракция и очистка экстракта

2.6.1.1. Вода. Пробу воды (100 мл), насыщенную хлористым натрием (30 г), помещают в делительную воронку, приливают 3 мл 1 N раствора соляной кислоты и экстрагируют трижды хлороформом порциями по 10 мл. Хлороформ отбрасывают. К водному слою приливают 5 мл водного аммиака и экстрагируют амбиол тремя порциями хлороформа по 50 мл. Хлороформные экстракты объединяют, промывают 10 мл воды, пропускают через слой безводного сернокислого натрия, помещенного на фильтровальную бумагу в коническую воронку. Фильтрат концентрируют на ротационном испарителе до объема 1 - 2 мл, затем в токе воздуха до объема 0,3 - 0,5 мл и всю пробу наносят на пластинку. Колбу обмывают двумя мл хлороформа, который концентрируют в токе воздуха до объема ~ 0,3 - 0,5 мл, и этот объем также наносят на пластинку в то же пятно.

2.6.1.2. Почва, зерно и зеленая масса кукурузы. Навеску пробы (25 г) экстрагируют трижды смесью этанол:аммиак в соотношении 50:2 мл на механическом встряхивателе в течение 30; 15; 15 мин. Экстракты фильтруют под вакуумом через бумажный фильтр в конической воронке, концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,5 - 1 мл, затем в токе воздуха до отсутствия запаха этилового спирта. К остатку приливают 20 мл дистиллированной воды, 3 мл 1 N раствора соляной кислоты и фильтруют через бумажный фильтр. Колбу и фильтр промывают 5 мл дистиллированной воды. К фильтрату приливают 1 мл этилового спирта и экстрагируют 5 раз хлороформом порциями по 5 мл. Хлороформный экстракт отбрасывают. К водному слою приливают 5 мл водного аммиака (pH не менее 10) и экстрагируют четырьмя порциями хлороформа по 20 мл.

Объединенный хлороформный экстракт промывают тремя порциями по 5 мл насыщенного водного раствора хлористого натрия, пропускают через слой безводного сернокислого натрия в конической воронке и концентрируют на ротационном испарителе до объема 1 мл, затем в токе воздуха до ~ 0,3 - 0,5 мл. Остаток с помощью капилляра наносят на пластинку. Колбу дважды обмывают 2 мл хлороформа, который после концентрирования в токе воздуха до 0,3 - 0,5 мл также наносят на пластинку.

2.6.2. Условия хроматографирования

На пластинки с нанесенными пробами на расстоянии 15 мм друг от друга наносят серию стандартных растворов амбиола, содержащих 0,2; 0,5; 1,0; 2,0; 5,0; 10,0 и 20,0 мкг. Для этого в семь пробирок вносят 2; 5; 10 мл стандартного раствора N 2 и наносят в хлороформе, как описано для проб.

    Хроматограмму   развивают  в  системе  N  1  до  тех  пор,  пока  фронт
растворителя  не  поднимется  на  всю  высоту  10 см. После развития в двух
системах  пластинку  подсушивают  при температуре 60 - 80 °C и обрабатывают
проявляющим  реактивом.  Амбиол проявляется в виде желто-оранжевых пятен на
светлом фоне с R  0,30 +/- 0,03. Окраски пятен и фона устойчивы.
                f

2.7. Обработка результатов анализа

Количественное определение амбиола в анализируемой пробе проводят путем сравнения площадей и интенсивности пятен пробы и серии стандартов.

Содержание амбиола в пробе (X) в мг/кг или мг/л вычисляют по формуле [KL1]:

                                      A
                                  X = -,
                                      P

где:

A - количество вещества, найденное в хроматографируемой пробе, мкг;

P - навеска анализируемой пробы в г или объем анализируемой воды в мл.

3. Требования безопасности

Соблюдать все необходимые требования безопасности работы в химических лабораториях, Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях, отделениях, отделах санитарно-эпидемиологических учреждениях системы Минздрава СССР, N 2455-81 от 20.10.1981, а также соблюдать правила безопасности, принятые для работы с легковоспламеняющимися жидкостями и пестицидами.

Комментарии
Комментирование через социальные сервисы Facebook и Вконтакте: