Временные методические указания по определению 2-амино-4-диметиламино-6-хлор-1,3,5-триазина в воздухе хроматографическими методами

Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6159-91

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика вещества

             N
           // \                                       C H N Cl.
    Cl--C //   \ C--NH                                 5 8 5
         ¦     ¦¦     2
         ¦     ¦¦                                     М.м. 173,61.
        N \\   / N
           \\ /C
             ¦
             N
            / \
          H C  CH
           3     3

2-Амино-4-диметиламино-6-хлор-1,3,5-триазин (АДХТ) - метаболит и полупродукт синтеза грамекса. Белое кристаллическое вещество без запаха с Т пл. 210 - 211 °C. Растворимость в воде - 0,049% (25 °C), ацетоне - 1,94%, хлороформе - 0,34%.

ОБУВ для воздуха рабочей зоны 1,5 мг/куб. м.

2. Методика измерения концентраций АДХТ в воздухе рабочей зоны

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на использовании тонкослойной и газожидкостной хроматографии с применением пламенно-ионизационного детектора.

Отбор проб проводится с концентрированием на фильтр, в хлороформ и на полисорб.

2.1.2. Избирательность метода

Измерению не мешают другие триазины - полупродукты производства производных сульфанилмочевин.

2.1.3. Метрологическая характеристика метода

Нижний предел измерения АДХТ в хроматографируемом объеме пробы 1 мкг (ТСХ) и 0,01 мкг (ГЖХ).

Нижний предел измерения АДХТ в воздухе 0,01 мг/куб. м.

Диапазон измеряемых концентраций АДХТ в воздухе от 0,01 до 2 мг/куб. м. Данные по метрологической характеристике методики представлены в таблице.

Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 2,0%.

Время выполнения измерения, включая отбор проб, 2 часа (ГЖХ) и 3 часа (ТСХ).

Таблица

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗМЕРЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ 2-АМИНО-4-ДИМЕТИЛАМИНО-6-ХЛОР-1,3,5-ТРИАЗИНА (АДХТ) В ВОЗДУХЕ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ

----------+----------+------------+---------------+------------------------
¦  Метод  ¦  Предел  ¦  Процент   ¦    Средняя    ¦     Доверительный     ¦
¦измерения¦измерения,¦определения,¦ квадратичная  ¦  интервал (p = 0,95)  ¦
¦         ¦мг/куб. м ¦     %      ¦    ошибка     ¦                       ¦
¦         ¦          ¦            ¦  определения, ¦                       ¦
¦         ¦          ¦            ¦      мкг      ¦                       ¦
+---------+----------+------------+---------------+-----------------------+
¦ГЖХ      ¦0,01      ¦65          ¦+/- 1,1        ¦+/- 0,8 (n  = 4, m = 4)¦
¦         ¦          ¦            ¦               ¦          a            ¦
+---------+----------+------------+---------------+-----------------------+
¦ТСХ      ¦0,01      ¦90          ¦+/- 0,5        ¦+/- 0,4 (n  = 6, m = 4)¦
¦         ¦          ¦            ¦               ¦          a            ¦
----------+----------+------------+---------------+------------------------

2.2. Реактивы, растворы и материалы

Ацетон чда, ТУ 6-08-3513-75.

Бензол чда, ГОСТ 5955-75.

Натрий сернокислый б/в, ч, ГОСТ 4106-76.

Этиловый эфир уксусной кислоты чда, ГОСТ 1277-75.

Серебро азотнокислое чда, ГОСТ 1277-75.

Бромфеноловый синий чда, ТУ 6-09-37-9-83.

Лимонная кислота осч, ТУ 6-09-584-75.

Силикагель КСК N 2, ГОСТ 3956-76, ТУ 6-09-2523-72.

Силикагель ЛС 5/40 мю для тонкослойной хроматографии с 13% гипса (Хемапол, ЧССР).

Пластинки для тонкослойной хроматографии "Силуфол R" (Хемапол, ЧССР).

Калий иодистый чда, ГОСТ 4232-74.

Крахмал растворимый чда, ГОСТ 10163-76.

Калий марганцовокислый чда, ГОСТ 20490-75, 3-процентный водный раствор.

Хлористоводородная кислота хч, ГОСТ 18290-72, 12-процентный водный раствор.

Кальций сернокислый чда, ГОСТ 3210-66.

Кальций хлористый ч, ГОСТ 4460-77.

Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74.

Хроматон N-AW, 0,16 - 0,20 мм, с 5% XE-60, промытый кислотой и силанизированный ДМСХ.

Хромосорб W-HP, 80/100 меш, с 3% OV-17.

Полисорб C, 60/100, ТУ 6-05-24-1313-86.

2.3. Приборы, аппаратура и посуда

Газовый хроматограф с пламенно-ионизационным детектором.

Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.

Фильтродержатели.

Склянка Дрекселя вместимостью 250 мл.

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Аппарат для встряхивания, ТУ 64-1-1081-73.

Водяная баня, ТУ 64-22-603-75.

Электроплитка, ТУ 92-275-76.

Поглотители Зайцева с пористой пластинкой, ТУ 25-11-1081-75.

Стеклянные концентрационные трубки (гофрированные).

Стеклянные пластинки, 15 х 15 см.

Сито капроновое, 100/120 меш.

Пульверизатор стеклянный для обработки пластинок.

Камера для обработки пластинок, ТУ 25-11-430-70.

Камера хроматографическая, ГОСТ 10565-63.

Эксикатор, ГОСТ 6471-73.

Сушильный шкаф, ТУ 69-1-1411-76.

Микрошприц емкостью 10 мкл МШ-10.

Фарфоровая ступка (d = 86), ГОСТ 9147-78.

Стеклянный водоструйный насос, МРТУ 42961-64.

Весы лабораторные ВЛА-200М.

Колбы мерные вместимостью 100 мл, ГОСТ 1770-74

2.4. Отбор пробы воздуха

Способ 1. Воздух с объемным расходом 2 л/мин. аспирируют через последовательно соединенный бумажный фильтр "синяя лента" и склянку Дрекселя, содержащую 70 мл хлороформа и помещенную в охлаждающую смесь льда и хлорида натрия. Для определения 1/2 ПДК достаточно отобрать 4 л воздуха.

Способ 2. При использовании полисорба для поглощения АДХТ воздух с объемным расходом 3 л/мин. аспирируют через последовательно соединенные фильтродержатель и концентрационную гофрированную трубку из стекла, содержащую 5 г полисорба.

Пробы можно хранить в холодильнике в течение двух недель.

2.5. Подготовка к измерению

2.5.1. Приготовление пластинок с тонким слоем силикагеля для ТСХ

35 г силикагеля КСК, просеянного через сито 100/120 меш, смешивают с 2 г сернокислого кальция и 90 мл дистиллированной воды в фарфоровой ступке или на аппарате для встряхивания в течение 15 минут. Около 10 г сорбционной массы наносят на стеклянную пластинку 15 x 15 см и, покачивая, равномерно распределяют по поверхности. Пластинки сушат на воздухе в горизонтальном положении при комнатной температуре 12 часов и затем активируют в сушильном шкафу при 190 °C в течение 30 минут. Хранят в эксикаторе над слоем хлористого кальция. При использовании для приготовления пластинок силикагеля ЛС 14 г этого силикагеля смешивают с 38 мл дистиллированной воды. На одну пластинку наносят 5 - 7 г сорбционной массы и далее поступают так, как это описано выше.

2.5.2. Приготовление проявляющих реактивов для ТСХ

Проявляющий реактив N 1:

раствор N 1 - в мерную колбу на 100 мл помещают 0,25 г йодистого калия и доводят до метки дистиллированной водой;

раствор N 2 - 0,75 г растворимого крахмала заваривают в 25 мл дистиллированной воды и затем охлаждают;

пластинку обрабатывают смесью (1:1) растворов N 1 и N 2. Реактив готовят перед употреблением.

Проявляющий реактив N 2:

раствор N 1 - в мерную колбу на 100 мл помещают 0,4 г бромфенолового синего и доводят до метки дистиллированной водой;

раствор N 2 - в мерную колбу на 100 мл помещают 2 г азотнокислого серебра и доводят до метки дистиллированной водой; пластинку обрабатывают смесью (1:1) растворов N 1 и N 2 и затем 4-процентным водным раствором лимонной кислоты.

Проявляющие растворы при хранении в плотно закрытых склянках без доступа света годны для применения в течение месяца.

2.5.3. Приготовление стандартного раствора

Стандартный раствор АДХТ в ацетоне с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 10,0 мг вещества в мерной колбе на 100 мл.

2.5.4. Приготовление хроматографической колонки

Стеклянную спиральную хроматографическую колонку (длина 1 м, внутренний диаметр 3 мм) заполняют хромосорбом W-HP с 3% OV-17 под вакуумом и кондиционируют при 180 °C в течение 8 - 10 часов в токе азота.

2.5.5. Построение градуировочного графика для определения АДХТ методом ГЖХ

Количественный анализ с помощью газовой хроматографии АДХТ проводят методом абсолютной калибровки. Для этого градуировочные растворы с содержанием АДХТ 3, 4, 10 и 15 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора ацетоном. Градуировочные растворы устойчивы в течение месяца при хранении в холодильнике.

    2   мкл   каждого  градуировочного  раствора  вводят  в  хроматограф  и
хроматографируют   при   следующих   условиях   (хроматограф  "Цвет-106"  с
пламенно-ионизационным  детектором): температура термостата колонок 150 °C,
температура  термостата  испарителя  260  °C, скорость потока газа-носителя
                                                                   -12
(азот  особой  чистоты)  40  мл/мин.,  шкала  электрометра  10 x 10      А,
скорость диаграммной ленты потенциометра 240 мм/час. Время удерживания АДХТ
в этих условиях 6 мин.

Хроматографирование одного стандартного раствора производят трижды. Измеряют на хроматограммах высоты пика (мм) АДХТ и строят график зависимости высоты пика АДХТ от его концентрации (мкг/мл). Полученные данные обрабатывают по методу наименьших квадратов и получают уравнение калибровочного графика в виде:

H = A + B x X,

где:

H - высота пика АДХТ на хроматограмме, мм;

X - содержание АДХТ в ацетоне, мкг/мл;

A и B - коэффициенты, которые получают при обработке калибровочного графика по методу наименьших квадратов.

2.6. Описание измерения

2.6.1. Измерение АДХТ с помощью тонкослойной хроматографии

    При   отборе   пробы   воздуха   по   способу  1  фильтр  извлекают  из
фильтродержателя, переносят в стакан на 100 мл, заливают 30 мл хлороформа и
оставляют   на  10  минут, периодически  перемешивая  стеклянной  палочкой.
Хлороформ  сливают  в  круглодонную  колбу  со  шлифом на 250 мл через слой
безводного  сульфата  натрия  (10  г),  помещенного  в  воронку,  а  фильтр
промывают двумя порциями хлороформа по 10 мл, сливая эти порции и хлороформ
из  склянки  Дрекселя  в ту же колбу, упаривают растворитель на ротационном
испарителе  при  температуре  водяной  бани 45 °C до объема ~ 1 мл. Остаток
количественно  наносят  на  хроматографическую  пластинку  с  тонким  слоем
силикагеля   (могут   быть   использованы   пластинки,   приготовленные   в
лабораторных условиях,  и  пластинки  "Силуфол R").  На  эту  же  пластинку
наносят стандартные количества (1 и 2 мкг) АДХТ в виде раствора в ацетоне и
проводят хроматографирование в системе растворителей этилацетат - хлороформ
(1:1)  в  хроматографической  камере,  насыщенной  в течение 2 часов парами
подвижных   растворителей.   Для   насыщения  стенки  камеры  обкладываются
фильтровальной    бумагой,    которая    пропитывается   смесью   подвижных
растворителей.   После  окончания  процесса  хроматографирования  пластинку
извлекают  из  камеры  и сушат на воздухе в вытяжном шкафу. Для обнаружения
АДХТ  пластинку обрабатывают смесью N 1 и N 2 (1:1) проявляющего реактива N
2  и  затем   4-процентным   водным   раствором   лимонной   кислоты.  АДХТ
обнаруживается  в  виде  синих  пятен  на желтом фоне с величиной R  = 0,61
                                                                   f
+/- 0,05.
    Для  повышения  надежности идентификации АДХТ хроматографирование может
быть  также  проведено  в  системе растворителей ацетон - бензол (3:2). Для
обнаружения  АДХТ пластинку предварительно помещают в эксикатор (камера для
хлорирования)  на  2  минуты,  на  дне   которого   наливают   смесь  (1:1)
3-процентного водного раствора  марганцовокислого  калия  и  12-процентного
водного раствора хлористоводородной кислоты (камера насыщается парами хлора
через 5 - 10 минут после помещения в нее растворов марганцовокислого  калия
и хлористоводородной кислоты).  Затем  пластинку  вынимают  из  эксикатора,
помещают   в  вытяжной  шкаф  на  40  минут  для  удаления  паров  хлора  и
обрабатывают  проявляющим  реактивом  N 1. АДХТ обнаруживается в виде синих
пятен  на  светло-голубом  фоне  с  величиной R  = 0,82 +/- 0,05 (пластинки
                                               f
"Силуфол R").

При отборе пробы воздуха по способу 2 полисорб из концентрационной гофрированной трубки из стекла помещают в бюретку на 25 мл (диаметр 10 мм) с краном на конце и АДХТ элюируют 60 мл ацетона со скоростью 1 - 2 мл/мин. Элюат сушат над безводным сульфатом натрия (5 - 10 г) в течение 0,5 - 1,0 часа при периодическом помешивании, удаляют растворитель на ротационном испарителе до объема ~ 1 мл и далее поступают так, как описано выше.

2.6.2. Измерение АДХТ с помощью газожидкостной хроматографии

Подготовка проб для измерения проводится так же, как это описано для тонкослойной хроматографии (п. 2.6.1).

При отборе пробы воздуха по способу 1 объединенный хлороформный раствор сушат над безводным сульфатом натрия (5 - 10 г) в течение 0,5 - 1,0 часа при периодическом перемешивании и удаляют растворитель на ротационном испарителе при температуре водяной бани 45 °C до объема ~ 0,5 мл. Остаток растворителя током теплого воздуха удаляют досуха и сухой остаток количественно переносят ацетоном (~ 1 мл) в градуировочную центрифужную пробирку на 10 мл. Током теплого воздуха упаривают содержимое пробирки до 0,2 мл и 2 мкл вводят в хроматограф. Хроматографирование одной пробы проводят дважды, измеряют среднее значение высоты пика АДХТ и по калибровочному графику находят содержание АДХТ. При отборе пробы воздуха по способу 2 остаток ацетона (~ 1 мл) из круглодонной колбы на 250 мл количественно переносят в градуировочную центрифужную пробирку на 10 мл и током теплого воздуха упаривают содержимое до 0,2 мл. 2 мкл ацетонового раствора вводят в хроматограф и далее поступают так, как это описано выше.

2.7. Обработка результатов анализа

2.7.1. Метод ТСХ

Концентрацию АДХТ в воздухе C в мг/куб. м при измерении с помощью тонкослойной хроматографии вычисляют по формуле:

                                         3
                                   A x 10
                               C = -------,
                                     V
                                      20

    где:
    A - количество АДХТ в анализируемом объеме пробы, мг;
    V   - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным
     20
условиям, л.
    Приведение  объема воздуха к стандартным условиям проводят по следующей
формуле:

                              V  x (273 + 20) x P
                               t
                        V   = -------------------,
                         20   (273 + t) x 101,33

    где:
    V  - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
     t

P - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

t - температура воздуха в месте отбора пробы, °C.

Количественную оценку АДХТ на хроматограммах проводят путем сравнения интенсивности окраски и площадей пятен пробы и стандартных растворов АДХТ или по величине площади пятен по формуле:

                                A  - A
                                 2    1
                       A = A  - ------- x (S  - S),
                            2   S  - S      2
                                 2    1

    где:
    A,  S  - количество (мкг) и площадь (кв. мм) пятна АДХТ в анализируемой
пробе;
    A ,  A , S , S  - количество (мкг) и площадь (кв. мм) пятен стандартных
     1    2   1   2
растворов АДХТ с большим и меньшим содержанием по сравнению с анализируемой
пробой.

Величину площади пятен определяют, накладывая на пластинку прозрачную бумагу или кальку, - очерчивают контур пятна, переносят его на миллиметровку и подсчитывают число кв. мм, входящих в контур.

2.7.2. Метод ГЖХ

Концентрацию АДХТ в воздухе C в мг/куб. м при измерении газожидкостной хроматографией вычисляют по формуле:

                                          3
                              (H - A) x 10  x V
                          C = -----------------,
                                   B x V
                                        20

где:

H - высота пика АДХТ на хроматограмме анализируемой пробы, мм (среднее значение из двух параллельных определений);

V - общий объем ацетонового раствора пробы АДХТ, мл;

A и B - коэффициенты, которые получают при обработке калибровочного графика по методу наименьших квадратов.

3. Требования безопасности

Соблюдаются требования безопасности, рекомендуемые при работе в химических лабораториях.

Комментарии
Комментирование через социальные сервисы Facebook и Вконтакте: