Методические указания по определению имидоклоприда в воде, почве, сахарной свекле тонкослойной хроматографией

Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6154-91

1. Краткая характеристика препарата

Действующее вещество имидоклоприда - 1-[6-хлоро-3-пиридинил/метил]-4,дигидро-N-нитро-Iн-имидазол-2-амин.

Структурная формула:

        ____      ------
    Cl-//  \\CH -N¦    ¦NH
       \____/  2   \  /
       N----        \/
                    ||
                     N - NO
                           2

    Эмпирическая формула: C H  ClN O .
                           9 10   5 2

Молекулярная масса - 255,6.

Химически чистое соединение - белое кристаллическое вещество без запаха.

Препарат растворим (20 °С) в воде - 0,58 г/л, гексане - 0,1 г/л, дихлорметане - 81 г/л, 2-пропаноле - 1,6 г/л, толуоле - 0,94 г/л.

ПДК в воде - 0,005 мг/л, ОДК в почве - 0,04 мг/кг, МДУ в сахарной свекле - не допускается.

2. Методика определения имидоклоприда в воде, почве, сахарной свекле

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Методика основана на определении имидоклоприда в воде, почве, сахарной свекле тонкослойной хроматографией после экстракции препарата из проб хлороформом и очистки экстракта.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

Предел обнаружения - 0,5 мкг.

Нижний предел определения:

вода - 0,001 мг/л

почва - 0,005 мг/кг

сахарная свекла - 0,01 мг/кг.

Среднее значение определения:

вода - 99,5%

почва - 90%

сахарная свекла - 95,0%.

Суммарная погрешность определения - +/- 11 - 12%.

2.2. Реактивы и материалы

Имидоклоприд, 99,5% препарат, фирма "Bayer".

Хлороформ, ч., ГОСТ 20015-74.

с-Толидин, ТУ 6-09-2232-75.

Ацетон, ч.д.а., ГОСТ 2603-79.

Гексан, х.ч., ТУ-6-09-3375-78.

Бензол, х.ч., ГОСТ 5965-75.

Натрий сернокислый безводный, ч.д.а., ГОСТ 4266-76.

Вода дистиллированная, ГОСТ 7602-72.

Пластины "Силуфол" (ЧССР).

Фильтры бумажные, "красная лента", ТУ 6-09-1678-77, диаметр 6,0 - 9,0 мм.

Вата гигроскопическая.

Уксусная кислота, ч.д.а., ГОСТ 61-75.

Калий йодистый, ч.д.а., ГОСТ 4232-74.

2.3. Приборы, посуда

Весы аналитические, ВЛА-200, ГОСТ 19491-74.

Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.

Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Холодильник бытовой.

Шкаф электрический сушильный, ТУ 64-1-1411-72.

Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.

Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ 25336-82.

Колбы грушевидные, вместимостью 50 - 100 мл (для отгонки растворителя), ГОСТ 25336-82.

Холодильник, ГОСТ 25336-82.

Колбы мерные, цилиндры мерные, пробирки, ГОСТ 1770-74.

Колбы конические плоскодонные, ГОСТ 25336-82.

Воронки лабораторные, диаметр 56 мл, ГОСТ 25336-82.

Пипетки на 1,5; 10,0 мл, ГОСТ 20292-74.

Воронки делительные на 250 мл, ГОСТ 25336-82.

Микропипетки на 0,1; 0,2 мл, ГОСТ 20292-74.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.

Скальпель.

Камера для хроматографирования, ГОСТ 25336-82.

Камера для опрыскивания пластинок, ГОСТ 25336-82.

Секундомер, ГОСТ 5072-79.

Лампа ртутно-кварцевая ПРК-4, ТУ 536-280-74.

2.4. Подготовка к определению

2.4.1. Отбор и подготовка проб

Отбор проб проводят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР 21.08.79 N 2051-79.

2.4.2. Приготовление стандартного, рабочих растворов имидоклоприда

Стандартный раствор имидоклоприда с концентрацией 100 мкг/мл готовят растворением соответствующей навески препарата (10,0 мг) в ацетоне в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике. Годен к употреблению в течение 30 дней.

Рабочие растворы имидоклоприда с концентрацией 2,5; 5,0; 10,0; 20,0 мкг/мл готовят в градуированных пробирках вместимостью 10 мл соответствующим разбавлением ацетоном стандартного раствора.

Хранят рабочие растворы имидоклоприда в холодильнике. Годен к употреблению в течение 3 - 5 дней.

2.4.3. Проявляющий реактив

Готовят раствор о-толидина (16 г) в 30 мл уксусной кислоты, доводят до 500 мл дистиллированной водой и прибавляют 1 г йодида калия. После опрыскивания пластинку следует облучать УФ-светом.

2.4.4. Приготовление пластин "Силуфол"

Пластинку "Силуфол" помещают в хроматографическую камеру, содержащую смесь растворителей: ацетон, 25-процентный аммиак в соотношении 7:3 (об./об.). Глубина погружения пластинки в растворитель составляет 0,5 см. После подъема фронта растворителя до верхнего края пластинки ее вынимают из камеры и выдерживают на воздухе до испарения растворителей. После этого пластинка готова к употреблению. Хранят подготовленные пластинки в эксикаторе.

2.5. Проведение определения

2.5.1. Экстракция и очистка

Вода. Пробу воды (500 мл) фильтруют от механических примесей. Имидоклоприд экстрагируют хлороформом по 15 - 20 мл три раза.

Объединенный хлороформный экстракт пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на ротационном испарителе при t = 55 °C досуха.

Почва. Пробу воздушно-сухой почвы просеивают через сито. Для анализа берут 100 г почвы. Экстракцию проводят хлороформом 3 раза по 50 мл. Объединенный хлороформный экстракт фильтруют через плотный двойной бумажный фильтр, пропускают через безводный сульфат натрия и упаривают на ротационном испарителе при t = 55 °С досуха.

Сахарная свекла. 50 - 100 г навески измельчают. Экстрагируют хлороформом 3 раза по 30 - 50 мл. Объединенный хлороформный экстракт фильтруют через плотный бумажный фильтр, пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на ротационном испарителе при t = 55,6 °C досуха.

2.5.2. Хроматографирование

Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона, закрывают колбу герметичной пробкой, перемешивают содержимое и 0,2 мл полученного раствора наносят микропипеткой на подготовленную пластинку "Силуфол". Рядом с пробой наносят по 0,2 мл каждого рабочего раствора имидоклоприда, что соответствует содержанию в пятне 0,5; 1,0; 2,0 мкг препарата.

    Пластинку помещают в хроматографическую камеру, куда за 10 - 15 мин. до
хроматографирования  наливают  смесь  растворителей  бензол-ацетон  (1:1) -
смесь  N  1  либо гексан-ацетон (1:1) - смесь N 2 в таком количестве, чтобы
глубина погружения пластинки в растворитель составила 0,5 см. После подъема
фронта  растворителя  от  линии  старта на высоту 10 см хроматографирование
прекращают.   Пластинку   выдерживают   в   вытяжном   шкафу  до  испарения
растворителей, обрабатывают проявляющим реагентом и подвергают УФ-облучению
в  течение  1  - 5 мин. Пластинку помещают на расстояние 20 см от источника
света.  При наличии имидоклоприда на хроматограмме проявляются пятна синего
цвета.  Величина  R   имидоклоприда  в  указанных  подвижных  растворителях
                   1
следующая:

бензол-ацетон (1:1) - 0,6 +/- 0,02;

гексан-ацетон (1:1) - 0,5 +/- 0,02.

Минимально детектируемое количество имидоклоприда - 0,5 мкг.

2.5.3. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят путем сравнения площади и интенсивности пятен пробы и стандартных растворов.

Концентрацию имидоклоприда (X) в воде (мг/л), почве, сахарной свекле (мг/кг) вычисляют по формуле:

                                    А x V
                                Х = ------,
                                    P x V
                                         1

    где:
    А - количество имидоклоприда, найденное путем сравнения со стандартами,
мкг;
    Р - навеска (объем) исследуемой пробы, г, л;
    V - конечный объем экстракта пробы, мл;
    V  - хроматографируемый объем пробы, мл.
     1

3. Требования безопасности

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях. При работе с ядовитыми и взрывчатыми веществами реакции следует проводить только в вытяжном шкафу, строго соблюдая правила производственной санитарии и личной гигиены.

Комментарии
Комментирование через социальные сервисы Facebook и Вконтакте: