Методические указания по определению фуратиокарба (промета) в растительном материале хроматографическими методами

Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6143-91

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. Краткая характеристика препарата

Фуратиокарб (промет) - O-п-бутил-о(2,2-диметил-2,3-дигидробензофуран-7-ил)-N,N-диметил-N,N-тиодикарбомат.

                  CH   CH    O - C H
                  ¦ 3  ¦ 3  /     4 9
            O     N    N - C                       C  H  N O .
     / \\ /   \ /   \ /    \\                       18 26 2 5
    ¦¦   ¦     C     S      O
    ¦¦   ¦     ¦¦                                  М.м. 382,47.
     \ // \    O
      \    \O
     H-T----+-CH
       ¦    ¦   3
       H    CH
              3

    Фуратиокарб  - кристаллическое вещество. Растворим в метаноле,
изопропаноле,   ацетоне,  циклогексане,  метиленхлориде,  толуоле,
                                                         -7
гексане,  в  воде 10 мг/л. Летучесть при 20 °C - 6,3 x 10   мм рт.
ст. Применяется в качестве инсектицида для обработки семян.

МДУ в сахарной свекле - не допускается.

2. Методика определения фуратиокарба (промета) в растительном материале (кукуруза) методом газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении промета из анализируемого образца органическим растворителем, затем проводят гидролиз при pH II и продукт гидролиза определяют методом реакционной газожидкостной хроматографии в виде производного динитробензола, а именно 7-(2,4-динитрофенокси)-2,2-диметил-2,3-дигидро-бензофурана, с использованием детектора постоянной скорости рекомбинации (ДПР), а также в тонком слое силикагеля с последующим применением для обнаружения зон локализации препарата проявляющего реагента.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода

------------+----------------+----------------+-------------+--------------
¦Исследуемый¦     Предел     ¦Среднее значение¦ Стандартное ¦Доверительный¦
¦   объект  ¦  обнаружения,  ¦ определения, % ¦отклонение, %¦ интервал, % ¦
¦           ¦      мг/кг     ¦                ¦             ¦             ¦
+-----------+----------------+----------------+-------------+-------------+
¦Кукуруза   ¦0,02 мг/кг (ГЖХ)¦90,7            ¦1,98         ¦+/- 4,1      ¦
¦           ¦1,0 мг/кг (ТСХ) ¦88,4            ¦2,15         ¦+/- 6,7      ¦
------------+----------------+----------------+-------------+--------------

2.1.3. Условия концентрации, очистки и последующего хроматографического определения промета позволяют избирательно определять препарат в присутствии ФОС, пиретроидов.

2.2. Реактивы и материалы

Ацетон, осч, ТУ 6-09-3513-86.

Гексан, ч, ТУ 6-09-3375-78.

Этилацетат, чда, ГОСТ 22300-81.

2,4-динитрофторбензол, 1-процентный раствор в ацетоне.

    Na HPO  x 12 x H O, ч, ГОСТ 4132-76.
      2   4         2

NaOH, хч, ГОСТ 4328-77.

Азот в баллоне, особой чистоты, ГОСТ 9293-74.

Неподвижная фаза 5% SE-30 на Хроматоне N-AW-DMCS.

Силикагель марки КСК.

Основной стандартный раствор (ОСР) фуратиокарба с концентрацией 100 мкг/мл готовят взятием навески 10 мг (0,0100 г) хч и растворением в ацетоне в мерной колбе емкостью 100 мл. Хранят в холодильнике в течение 6-ти месяцев.

Рабочие стандартные растворы с содержанием 10 мкг/мл, 1 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением ОСР ацетоном. Хранить в холодильнике в течение 2-х месяцев.

Буферный раствор - pH = 11 - готовят следующим образом: смешивают 50 мл 0,05 М водного раствора двузамещенного фосфата натрия и 4,1 мл 0,1 М раствора NaOH в мерной колбе на 100 мл.

Марганцевокислый калий, хч, ГОСТ 20490-75.

Соляная кислота, конц., ч, ГОСТ 3118-67.

о-Толидин, ТУ 6-09-2232-75, 1-процентный раствор в ацетоне.

2.3. Приборы, аппаратура и посуда

Газовый хроматограф серии "Цвет" с ДПР.

Колонки стеклянные длиной 1 м, диаметр 3,5 мм.

Ротационный испаритель типа ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.

Колбы грушевидные (круглодонные), ГОСТ 25336-82, емкостью 500 мл, 250 мл, 100 мл, 50 мл ОКШ 500-29/50-14.

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, емкостью 50, 100 мл.

Пробирки мерные на шлифах, ГОСТ 1770-74, емкостью 5 и 10 мл.

Аппарат для встряхивания, ТУ 25-11-917-79.

Колба Бунзена, ГОСТ 25336-82.

Делительные воронки, ГОСТ 25336-82, емкостью 1000 мл, 25 мл.

Колбы конические, ГОСТ 25336-82, емкостью 500 мл.

Пипетки, ГОСТ 1770-74, на 0,1; 0,2; 1; 5; 10 мл.

Микрошприц на 10 мкл МШ-10, ТУ Е-2833024.

Секундомер СД Спр 1.2000, ГОСТ 5072-79.

Пластинки для хроматографии "Силуфол" (ЧССР, Хемапол).

Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.

Камера для хлорирования.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.

2.4. Подготовка к определению

2.4.1. Отбор проб

Отбор, хранение и доставка проб производятся в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Минздравом СССР, N 2057-79 от 21.08.79.

2.4.2. Подготовка колонки для ГЖХ

Колонку заполняют стандартной фазой (5% SE-30 на Хроматоне N-AW-DMCS), подключив ее к вакууму водоструйного насоса. Заполненную колонку кондиционируют в термостате колонок в течение 6 часов без подключения к детектору, продувая азотом (60 мл/мин.) и постепенно поднимая температуру от 100 °C до 250 °C. Затем колонку присоединяют к детектору.

2.5. Описание определения

2.5.1. Экстракция, очистка и получение 2,4-динитробензольного производного промета

Кукуруза. 25 г подготовленной пробы кукурузы (зерно с початком) помещают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл, заливают 100 мл ацетона или метанола, перемешивают тщательно в течение 20 мин. Затем фильтруют на воронке Бюхнера с фильтром "синяя лента", остаток на фильтре промывают 2 x 30 мл ацетона или метанола. Объединенный фильтрат разбавляют 300 мл воды и 100 мл гексана. Энергично встряхивают в делительной воронке, верхний гексановый слой, содержащий промет, собирают в круглодонную колбу на 300 мл. Экстракцию повторяют еще 2 x 30 мл. Объединенный гексановый экстракт упаривают на ротационном испарителе в вакууме водоструйного насоса при температуре бани ~ 40 °C досуха.

В случае необходимости проводят очистку проб следующим образом. Остаток после упаривания растворяют в 5 - 10 мл гексана и пропускают через слой силикагеля марки КСК, слой 2 см. Элюированный гексан отбрасывают. Промет извлекают 10 мл смеси гексан:этилацетат (1:1). Элюат собирают в грушевидную колбочку на 50 мл и упаривают на ротационном испарителе при температуре бани 40 °C досуха. К сухому остатку прибавляют 15 мл буферного раствора с pH 11. Колбу закрывают плотно пробкой и проводят гидролиз в течение 60 мин. на водяной бане при температуре 60 °C. Затем колбу быстро охлаждают в ледяной воде. К охлажденной реакционной смеси прибавляют 0,5 мл 1-процентного раствора 2,4-динитрофторбензола в ацетоне, закрывают пробкой и нагревают содержимое колбы на водяной бане при 60 °C в течение 30 мин. Спустя 30 мин. колбу с реакционной смесью охлаждают в ледяной воде, прибавляют 5 - 10 мл гексана, энергично встряхивают и отделяют гексановый слой в делительной воронке. Раствор гексана используют для определения промета методом газожидкостной хроматографии.

Хроматографический анализ

Газовый хроматограф серии "Цвет" с ДПР.

Колонка хроматографическая стеклянная длиной 1,0 м, внутренний диаметр 3,5 мм.

Неподвижная фаза - 5% SE-30 на Хроматоне N-AW-DMCS.

Температура колонки - 215 °C.

Температура испарителя - 250 °C.

Температура детектора - 260 °C.

Газ-носитель с расходом 65 - 70 мл/мин.

                             -12
    Шкала множителя - 20 x 10   .

Скорость диаграммной ленты - 240 мм/час.

Вводимый объем - 3 мкл.

Время удерживания - 4,0 мин.

Нижний предел измерения фуратиокарба 0,3 нг.

Количественную оценку проводят методом соотношения со стандартом.

Расчет результатов проводят по формуле:

                          C x H  x V  x V
                               2    1    3
                      X = ----------------,
                            H  x V  x P
                             1    2

    где:
    X - содержание промета в анализируемой пробе, мкг/кг;
    C  -  концентрация  стандартного  раствора фуратиокарба в виде
производного 2,4-динитробензола, вводимого в хроматограф, мкг/мл;
    H  - высота пика стандартного раствора, мм;
     1
    H  - высота пика пробы, мм;
     2
    V  - объем пробы в виде производного 2,4-динитробензола, мл;
     1
    V    -   объем   стандартного  раствора  в  виде  производного
     2
2,4-динитробензола, введенного в хроматограф, мкл;
    V   -  объем  пробы  в  виде  производного 2,4-динитробензола,
     3
введенного в хроматограф, мкл;
    P - навеска пробы в г.
    2.5.2. Определение методом ТСХ
    Пробу,  сконцентрированную  до  объема 0,1 - 0,2 мл (экстракт,
полученный в 2.5.1  до проведения гидролиза) микропипеткой наносят
на хроматографическую пластинку "Силуфол". Справа и слева от пробы
наносят   стандартные   растворы   промета   (1,0;  2,0;  5,0  мкг
препарата).  Хроматографируют  в  камере  в  системе растворителей
гексан:ацетон (3:2). После высушивания пластинку помещают в камеру
с  хлором на 5 - 10 с. (Для получения хлора в эксикатор помещают 5
-  10  г  KMnO   и  10  -  15  мл HCl, через несколько минут после
              4
перемешивания камера готова.) Затем пластинку вынимают из камеры и
оставляют на воздухе до исчезновения запаха хлора. После обработки
пластинки  1-процентным  раствором  о-толидина  в  ацетоне  промет
обнаруживается  в  виде коричневых пятен на белом фоне с величиной
R  = 0,51 +/- 0,05.
 f
    Содержание  фуратиокарба  в  исследуемой  пробе  вычисляют  по
формуле:

                               A
                           X = - мг/г,
                               P

где:

A - количество препарата, найденное на хроматограмме при сравнении со стандартом, мкг;

P - навеска пробы, г.

3. Техника безопасности

Соблюдать все необходимые требования при работе в химических лабораториях.

Комментарии
Комментирование через социальные сервисы Facebook и Вконтакте: