МУК 4.1.2680-10. 4.1. Методы контроля. Химические факторы. Определение остаточных количеств метазахлора в капусте методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания

Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
2 августа 2010 года

Дата введения:
1 октября 2010 года

1. Разработаны сотрудниками ГНУ Всероссийского НИИ защиты растений, Санкт-Петербург.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 10.06.2010 N 1).

3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 2 августа 2010 г.

4. Введены в действие с 1 октября 2010 г.

5. Введены впервые.

Название действующего вещества по ICO: Метазахлор.

Название по IUPAC: 2-хлор-N-(пиразол-1-илметил)ацет-2',6'-ксилидид.

Структурная формула (не приводится).

Мол. масса: 277,8.

    Брутто формула: C  H  ClN O.
                     14 16   3
    Химически  чистый  метазахлор представляет собой желтоватые кристаллы с
T   85 °C, давление паров 0,095 мПа.
 пл
    Коэффициент  распределения в  системе  н-октанол-вода  K   log P = 2,13
                                                            ow
(pH 7,22 °C).

Растворимость: в воде 430 мг/л (20 °C); ацетон, хлороформ > 1000, этилацетат 590, этанол 200, все в г/кг (20 °C).

Стабилен как минимум 2 года при 40 °C.

    ЛД   для крыс 2150 мг/кг.
      50

Область применения: гербицид, предназначен для борьбы с однолетними злаковыми и двудольными сорняками.

Гигиенические нормативы: МДУ в капусте 0,02 мг/кг.

1. Метрологическая характеристика метода

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

--------+-------------+---------------+--------------+---------+-----------
¦Объект ¦  Диапазон   ¦Норматив точ-  ¦ Стандартное  ¦Предел   ¦Предел    ¦
¦анализа¦определяемых ¦ности (граница ¦  отклонение  ¦повторя- ¦воспроиз- ¦
¦       ¦концентраций,¦относительной  ¦повторяемости,¦емости,  ¦водимости,¦
¦       ¦    мг/кг    ¦погрешности),  ¦  сигма , %   ¦r, %     ¦R, %      ¦
¦       ¦             ¦+/- дельта, %  ¦       r      ¦         ¦          ¦
+-------+-------------+---------------+--------------+---------+----------+
¦Капуста¦0,01 - 0,1   ¦<= 50          ¦5             ¦14       ¦42        ¦
--------+-------------+---------------+--------------+---------+-----------

Метрологическая характеристика метода представлена в табл. 1 и 2.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (n = 20) приведены в таблице 2.

Таблица 2

ПОЛНОТА ИЗВЛЕЧЕНИЯ МЕТАЗАХЛОРА, СТАНДАРТНОЕ ОТКЛОНЕНИЕ, ДОВЕРИТЕЛЬНЫЙ ИНТЕРВАЛ СРЕДНЕГО РЕЗУЛЬТАТА ДЛЯ n = 20, P = 0,95

--------+-------+-------------+------------+-----------+-------------------
¦Объект ¦Предел ¦  Диапазон   ¦  Среднее   ¦Стандартное¦  Доверительный   ¦
¦анализа¦обнару-¦определяемых ¦  значение  ¦отклонение,¦интервал среднего ¦
¦       ¦жения, ¦концентраций,¦определения,¦   S, %    ¦результата, +/-, %¦
¦       ¦мг/кг  ¦    мг/кг    ¦     %      ¦           ¦                  ¦
+-------+-------+-------------+------------+-----------+------------------+
¦Капуста¦0,01   ¦0,01 - 0,1   ¦88          ¦5,2        ¦9,8               ¦
--------+-------+-------------+------------+-----------+-------------------

2. Метод измерения

Методика основана на определении метазахлора методом капиллярной газожидкостной хроматографии с использованием электронозахватного детектора после его извлечения из образцов органическим растворителем, очистке путем перераспределения между двумя жидкими фазами и дополнительной очистке на патроне с силикагелем. Идентификация метазахлора проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.

Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.

3. Средства измерения, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства измерения

Весы аналитические ВЛА-200                                  ГОСТ 24104-2001

Весы технические ВЛКТ-500                                   ГОСТ 24104-2001

Газовый хроматограф "Кристалл 2000М" с ДЭЗ
Колбы мерные на 25, 50, 100 куб. см                         ГОСТ 23932-90
Микрошприц МШ-10, МШ-10М                                    ТУ 2-833-106
Пипетки градуированные                                      ГОСТ 29227-91
Цилиндры мерные на 50 и 100 куб. см                         ГОСТ 23932-90

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

В обычных условиях пиклорам и его препараты устойчивы, с основаниями пиклорам образует хорошо растворимые в воде соли.

3.2. Реактивы

Ацетон, х.ч.                                                ТУ 6-09-3513-82
Вода дистиллированная                                       ГОСТ 6709-72
н-Гексан, свежеперегнанный, ч.                              ТУ 6-09-3375-78
Метазахлор с содержанием основного компонента 99,9%
Натрий сернокислый безводный, свежепрокаленный, ч.д.а.      ГОСТ 4166-76
Натрий хлористый, х.ч.                                      ГОСТ 4233-77
Этилацетат, х.ч.                                            ГОСТ 22300-76
Элюент N 1 - этилацетат:гексан (19:1 по объему)
Элюент N 2 - этилацетат:гексан (9:1 по объему)
Элюент N 3 - этилацетат:гексан (8:2 по объему)

Допускается использование реактивов квалификацией не ниже указанных.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы

Ванна ультразвуковая УЗВ/100 ТН
Воронки лабораторные В-75-110                                ГОСТ 25336-82
Воронки делительные ВД-3-500                                 ГОСТ 8613-75
Капиллярная кварцевая колонка длиной 30 м,
внутренним диаметром 0,32 мм с неподвижной
фазой НР-1, толщина слоя 0,25 мкм
Колбы круглодонные на шлифах
КШ50 29/32 ТС                                                ГОСТ 25336-82
Колбы плоскодонные на шлифах
КШ100 29/32 ТС                                               ГОСТ 25336-82Е
Концентрирующие патроны ДИАПАК СИЛИКАГЕЛЬ
Пробирки с притертыми пробками на 5, 10 куб. см              ГОСТ 25336-82
Ротационный вакуумный испаритель
Buchi R-200/205 (Швейцария)
Фильтры бумажные "красная лента"                             ТУ 6.091678-86

Допускается использование другого вспомогательного оборудования с техническими характеристиками не хуже указанных.

4. Требования безопасности

4.1. При проведении работы необходимо соблюдать требования техники безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами (ГОСТ 12.1.005, ГОСТ 12.1.007). Организация обучения работников безопасности труда по ГОСТ 12.0.004.

При выполнении измерений с использованием газового хроматографа и работе с электроустановками соблюдать правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкциями по эксплуатации приборов.

4.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".

5. Требования к квалификации операторов

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом газожидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

6. Условия измерений

При выполнении измерений выполняют следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха 20 +/- 5 °C и относительной влажности не более 80%.

- выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Отбор проб и хранение

Отбор проб капусты проводят в соответствии с ГОСТ 1724-85 "Капуста белокочанная свежая. Заготовка и поставка" или ГОСТ 7967-87 "Капуста краснокочанная свежая. Заготовка и поставка". Для длительного хранения образцы капусты помещают в герметично закрытый двойной полиэтиленовый пакет и хранят в морозильной камере с температурой -18 °C.

8. Подготовка к определению

8.1. Кондиционирование колонки

Капиллярную колонку перед анализом кондиционируют в токе азота при температуре 250 °C до установления нулевой линии.

8.2. Приготовление рабочих растворов

Насыщенный раствор NaCl.

В коническую колбу на 250 куб. см наливают 150 куб. см дистиллированной воды и насыпают в нее хлористый натрий при постоянном перемешивании до тех пор, пока осадок не перестанет растворяться. Колбу выдерживают в течение 30 мин. при комнатной температуре, периодически помешивая раствор. Если осадок растворился, добавляют еще хлористого натрия и процедуру повторяют до образования стойкого осадка.

8.3. Приготовление градуировочных растворов

Точную навеску метазахлора (0,010 +/- 0,001 г) помещают в мерную колбу объемом 100 куб. см, растворяют в гексане, доводят до метки и получают основной раствор с концентрацией 100 мкм/мл.

Градуировочные растворы с концентрациями 1,0, 0,5, 0,2, 0,1 мкг/куб. см готовят из стандартного раствора методом последовательного разбавления гексаном по объему. Для приготовления раствора с концентрацией 1,0 мкг/куб. см в мерную колбу на 100 куб. см вносят 1 куб. см основного раствора и доводят до метки гексаном. Для получения градуировочных растворов с концентрациями 0,5, 0,2, 0,1 мкг/куб. см разбавляют предыдущий раствор (1 мкг/куб. см) в 2, 5 и 10 раз.

Все растворы хранят в холодильнике не больше одного месяца.

8.4. Построение градуировочной характеристики

Для построения градуировочного графика в хроматограф вводят по 1 куб. мм каждого из градуировочных растворов (3 параллельных определения для каждой концентрации, не менее 4-х точек по диапазону измеряемых концентраций), измеряют высоты или площади пиков и строят график зависимости среднего значения высоты или площади пика от концентрации метазахлора в градуировочном растворе (мкг/куб. см).

Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.

Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

                      |C - C |
                            к
                      -------- x 100 <= лямбда      ,
                         C                    контр.

    где:
    C   -   аттестованное  значение  массовой  концентрации  метазахлора  в
градуировочном растворе;
    C  - результат контрольного измерения массовой концентрации метазахлора
     к
в градуировочном растворе;
    лямбда        -  норматив  контроля  градуировочного  коэффициента,  %.
          контр.
(лямбда       = 8% при P = 0,95).
       контр.

9. Проведение определения

9.1. Определение метазахлора в капусте

Навеску измельченных кочанов капусты (20 +/- 0,1) г помещают в коническую колбу, заливают 50 куб. см 50%-ного водного ацетона и экстрагируют метазахлор в ультразвуковой ванне в течение 10 мин. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр "красная лента", остаток с фильтра переносят обратно в колбу и экстракцию повторяют еще два раза, используя каждый раз по 50 куб. см 50%-ного водного ацетона. От объединенного фильтрата берут аликвоту 1/2, соответствующую 10 г навески, и упаривают ее на ротационном испарителе до водного остатка при температуре не выше 40 °C. К остатку добавляют 10 куб. см насыщ. раствора NaCl, доводят объем до 50 куб. см дистиллированной водой и переносят в делительную воронку. Метазахлор трижды экстрагируют гексаном по 25 куб. см. После разделения фаз органический слой собирают в круглодонную колбу, фильтруя через слой безводного сульфата натрия (10 г). Гексан упаривают на ротационном испарителе при температуре не выше 40 °C. Сухой остаток очищают на патроне с силикагелем (п. 9.2).

9.2. Очистка проб на патронах с силикагелем

Очистку проводят на концентрирующем патроне ДИАПАК СИЛИКАГЕЛЬ. Патрон промывают 3 куб. см гексана.

Сухой остаток, полученный при упаривании очищенных по п. 10.1 экстрактов, количественно переносят тремя порциями по 1 куб. см гексана в патрон. Промывают патрон последовательно 2 куб. см гексана, 20 куб. см элюента N 1 (гексан:этилацетат 19:1). Фильфат отбрасывают. Метазахлор элюируют последовательно 10 куб. см элюента N 2 (гексан:этилацетат 9:1) и 5 куб. см элюента N 3 (гексан:этилацетат 8:2). Элюат собирают в грушевидную колбу и упаривают на ротационном испарителе при температуре не выше 40 °C. Сухой остаток растворяют в 1 куб. см гексана и 1 куб. мм вводят в испаритель хроматографа.

9.3. Условия хроматографирования

Газовый хроматограф "Кристалл 2000М" с ДЭЗ; колонка кварцевая капиллярная, длина 30 м, диаметр 0,32 мм с неподвижной фазой НР-1 (0,25 мкм); температура термостата колонки в программируемом режиме от 140 °C (1 мин.) до 180 °C со скоростью 20 °C/мин.; температура испарителя 250 °C, температура детектора 300 °C; газ-носитель - азот, расход газа-носителя 52,5 мл/мин. (давление 90 кПа), сброс - 50 мл/мин., поддув в ДЭЗ - 30 мл/мин., деление потока 1:20; хроматографируемый объем 1 куб. мм, анализируемый объем 1 куб. см. Время удерживания метазахлора 9 мин. 5 сек. +/- 5 сек.

10. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки, содержание метазахлора в образце капусты (X, мг/кг) вычисляют по формуле:

                                 H  x C x V
                                  2
                             X = ----------,
                                   H  x P
                                    1
    где:
    H  - высота  (площадь)  пика  метазахлора  в  стандартном  растворе, мм
     1
(мв x сек.);
    H   - высота (площадь)  пика  метазахлора  в  анализируемой  пробе,  мм
     2
(мв x сек.);

V - объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа, куб. см;

P - навеска анализируемого образца, г;

C - концентрация стандартного раствора метазахлора, мкг/куб. см.

Содержание остаточных количеств метазахлора в анализируемом образце вычисляют как среднее из 2-х параллельных определений.

При получении зашкаленных пиков анализируемый экстракт разбавляют гексаном.

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

                       2 x |X  - X | x 100
                             1    2
                       ------------------- <= r,                        (1)
                            (X  + X )
                              1    2

    где:
    X , X  - результаты параллельных определений, мг/кг;
     1   2
    r - значение предела повторяемости (r = 2,8 сигма ).
                                                     r

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

               _
              (X +/- ДЕЛЬТА) мг/кг при вероятности P = 0,95,

    где:
    _
    X   -   среднее   арифметическое  результатов  определений,  признанных
приемлемыми, мг/кг;

ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

ДЕЛЬТА = дельта x X / 100,

дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.

В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

"содержание вещества в пробе "менее нижней границы определения" (например: менее 0,01 мг/кг <*>).

--------------------------------

<*> 0,01 мг/кг - предел обнаружения метазахлора в капусте.

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 "Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений".

13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.

    Величина добавки C  должна удовлетворять условию:
                      д

                       C  = ДЕЛЬТА    + ДЕЛЬТА    ,
                        д         л,X         л,X'

    где  +/-  ДЕЛЬТА     (+/-  ДЕЛЬТА     ) -  характеристика   погрешности
                     л,X              л,X'
(абсолютная  погрешность)  результатов  анализа, соответствующая содержанию
компонента  в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента
в образце с добавкой, соответственно), мг/кг, при этом:

                        ДЕЛЬТА  = +/- 0,84 ДЕЛЬТА,
                              л

где ДЕЛЬТА - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

ДЕЛЬТА = дельта x X / 100,

дельта - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.

    Результат контроля процедуры K  рассчитывают по формуле:
                                  к

                             K  = X'- X - C ,
                              к            д

    где  X',  X,  C   -  среднее  арифметическое  результатов  параллельных
                   д
определений  (признанных  приемлемыми  по  п. 11)  содержания  компонента в
образце    с    добавкой,   испытуемом   образце,   концентрация   добавки,
соответственно, мг/кг.
    Норматив контроля K рассчитывают по формуле:

                              _____________________
                             /     2            2
                       K = \/ДЕЛЬТА     + ДЕЛЬТА   .
                                   л,X'         л,X

    Проводят  сопоставление результата контроля процедуры (K ) с нормативом
                                                            к
контроля (K).
    Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

                              |K | <= K,                                (2)
                                к

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R):

                       2 x |X  - X | x 100
                             1    2
                       ------------------- <= R,                        (3)
                            (X  + X )
                              1    2

    где:
    X , X  - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;
     1   2
    R  -  предел   воспроизводимости    (в   соответствии   с    диапазоном
концентраций), %.

14. Разработчики

ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений, Санкт-Петербург.

Комментарии
Комментирование через социальные сервисы Facebook и Вконтакте: