МУ 4.2.2839-11. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Порядок отбора, упаковки, хранения и транспортирования биологического материала для лабораторной диагностики бешенства у людей, погибших от гидрофобии. Методические указания

Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей
и благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
7 февраля 2011 года

Дата введения -
с момента утверждения

1. Разработаны: Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека; Государственным научно-исследовательским институтом стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А. Тарасевича; Центром специальной лабораторной диагностики и лечения особо опасных и экзотических инфекционных заболеваний Минобороны РФ.

2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3. Утверждены и введены в действие Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 7 февраля 2011 г.

4. Введены впервые.

1. Область применения

1.1. Настоящие методические указания предназначены для патологоанатомов и судебно-медицинских экспертов, а также для специалистов органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, осуществляющих лабораторную диагностику погибших от гидрофобии (бешенства) лиц, а также общее руководство по отбору, упаковке, хранению и транспортированию секционных материалов.

1.2. В настоящих методических указаниях определены порядок отбора, упаковки, хранения и транспортирования биологического материала от умерших людей для проведения лабораторной диагностики заболевания, вызванного вирусом уличного бешенства.

2. Определения и сокращения

Авария         - нештатная ситуация, при которой создается реальная или
               потенциальная возможность заражения персонала
Биологическая
безопасность   - система медико-биологических, организационных и
               инженерно-технических мероприятий и средств, направленных на
               защиту работающего персонала, населения и окружающей среды
               от воздействия патогенных биологических агентов
ЛПО            - лечебно-профилактические организации
ОТ-ПЦР         - метод обратной транскрипции - полимеразной цепной реакции
RT-ПЦР         - метод полимеразной цепной реакции в реальном времени

3. Нормативные и методические ссылки

В настоящих методических указаниях использованы ссылки на следующие нормативные документы:

Федеральный закон "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения" от 30 марта 1999 г. N 52-ФЗ.

Положение о государственном санитарно-эпидемиологическом нормировании, утвержденное Постановлением Правительства Российской Федерации от 24 июля 2000 г. N 554.

СП 1.3.1285-03. Санитарные правила "Безопасность работы с микроорганизмами I - II группы патогенности (опасности)".

СП 1.2.036-95. Санитарные правила "Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I - IV групп патогенности".

МУ 1.3.1794-03 "Организация работы при исследованиях методом ПЦР материала, инфицированного микроорганизмами I - II групп патогенности".

WHO Expert consultation on rabies: First Report (2004: Geneva, Switzerland). WHO Technical Report Series 931. - 123 c.

Laboratory techniques in rabies. Fourth edition WHO, Geneva, 1996 г.

4. Общие положения

4.1. Забор материала от умерших с подозрением на инфекцию, вызванную вирусом уличного бешенства, и его упаковку проводит специально обученный персонал лечебно-профилактических организаций (ЛПО) в соответствии с требованиями действующих нормативных документов.

4.2. Доставка материала на исследование производится лечебно-профилактической организацией по согласованию с управлением Роспотребнадзора субъекта Российской Федерации с учетом требований биологической безопасности и оптимальной транспортной схемы в Центр специальной лабораторной диагностики и лечения особо опасных и экзотических инфекционных заболеваний Минобороны Российской Федерации.

4.3. Управление Роспотребнадзора субъекта Российской Федерации согласовывает с Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека порядок доставки материала на исследование в Центр специальной лабораторной диагностики и лечения особо опасных и экзотических инфекционных заболеваний Минобороны Российской Федерации.

5. Правила отбора секционного материала

5.1. Отбор, упаковку и транспортирование секционного материала от лиц, предположительно погибших от гидрофобии (бешенства), осуществляет квалифицированный персонал, обученный правилам биологической безопасности и имеющий опыт патологоанатомического или судебно-медицинского исследования лиц, погибших от опасных и особо опасных инфекционных заболеваний, с соблюдением правил противоэпидемического режима в соответствии с СП 1.3.1285-03.

5.2. Во избежание заражения в процессе вскрытия необходимо соблюдать все меры предосторожности, включая тщательность препарирования и использование толстых резиновых перчаток.

5.3. Для исследования забирают следующие участки головного мозга:

- аммонов рог;

- мозжечок;

- кора больших полушарий.

Исследованию подвергаются также слюнные железы.

Размер секционного материала 15 мм x 15 мм.

5.4. Забор производят стерильными инструментами в стерильные одноразовые пластиковые флаконы с закручивающимися крышками (колбы, контейнеры), содержащие физиологический раствор, покрывающий взятый секционный материал.

5.5. От одного умершего от гидрофобии (бешенства) человека отбирают две пробы: одну пробу для исследования материала молекулярно-биологическими методами (ОТ-ПЦР или RT-ПЦР), вторую - для проведения вирусологического исследования. Вся работа по отбору проб должна проводиться в соответствии с требованиями биологической безопасности с соблюдением противоэпидемического режима.

5.6. Каждый образец материала помещают в отдельную транспортную емкость.

5.7. Отобранный секционный материал помещают в стерильные пластиковые флаконы (колбы, контейнеры), содержащие физиологический раствор, и подвергают глубокой заморозке до минус (65 +/- 5) °C (или в жидком азоте) либо до минус (20 +/- 4) °C. В исключительном случае допускается помещение секционного материала вместе с глицерином в стерильные пластиковые флаконы (колбы, контейнеры) при температуре (6 +/- 2) °C.

5.8. Запрещается помещать и хранить секционный биологический материал в формалине, а также в парафиновых блоках.

6. Упаковка и хранение образцов

6.1. Отобранный секционный материал до упаковки образца для транспортирования может храниться при следующих условиях:

- при температуре минус (65 +/- 5) °C (или в жидком азоте) - длительно;

- при температуре минус (20 +/- 4) °C - в течение 30 суток с момента отбора материала;

- при температуре (6 +/- 2) °C - не более 3 суток с момента отбора материала.

Допускается только однократное замораживание-оттаивание материала.

6.2. Все образцы, доставляемые в диагностическую лабораторию, должны быть герметично упакованы в соответствии с действующими нормативно-методическими документами:

- в транспортную емкость (плотно закрывающиеся стерильные пластмассовые колбы либо флаконы (контейнеры) с завинчивающимися крышками, проверенные на герметичность); плотно закрытый верхний конец транспортной емкости вместе с крышкой герметизируют различными пластификаторами (парафин, парафильм и др.); емкость маркируют;

- в плотный полиэтиленовый пакет подходящего размера с ватой (или другим гигроскопичным материалом) в количестве, достаточном для адсорбции всего образца в случае его утечки; полиэтиленовый пакет следует герметично заклеить или запаять.

6.2.1. В отдельный полиэтиленовый пакет вкладывают бланк направления с указанием: наименование направляющего учреждения, Ф.И.О. больного, возраст, место жительства, предварительный диагноз, эпидемиологический анамнез, вид материала, дата и время взятия материала.

6.2.2. Пакеты с образцами от одного пациента вместе с направлением упаковывают во второй плотный полиэтиленовый пакет. Не допускается упаковывание образцов материалов от разных людей в один и тот же пакет.

7. Порядок транспортирования биологического материала

7.1. Перед непосредственным транспортированием герметично закрытые полиэтиленовые пакеты достают из низкотемпературного холодильника и помещают в термоизолирующий плотно закрывающийся контейнер (термос либо сумка-холодильник), приспособленный для транспортирования биологических материалов.

7.1.1. Охлаждающие элементы перед транспортированием секционного материала необходимо замораживать при температуре минус (65 +/- 5) °C в течение (6 +/- 2) часов, а при температуре минус (20 +/- 4) °C - в течение (20 +/- 2) часов.

7.1.2. В термоконтейнеры и термосы помещают охлаждающие элементы или пакеты со льдом. К наружной стенке термоконтейнера или термоса прикрепляют этикетку с указанием вида материала, условий транспортирования, названия пункта назначения. Сроки и условия транспортирования упакованных проб клинического материала указаны в Приложении.

7.2. Транспортирование секционного материала в диагностическую лабораторию осуществляется нарочным(и), информированным о правилах доставки материала в соответствии с п. 3.4 СП 1.2.036-95.

8. Обеспечение биологической безопасности при отборе и транспортировании секционного материала

8.1. Вскрытие проводят в дополнительном комплекте специальной одежды, включающем: противочумный комплект, фартук, защитные очки или защитный щиток, средства индивидуальной защиты органов дыхания (респиратор типа ШБ-1 или РБ, Лепесток-200), двойные резиновые перчатки. После процедуры отбора материала перчатки обрабатываются растворами дезинфицирующих средств, руки после снятия перчаток обрабатываются антисептиками.

8.2. Лечебно-профилактические организации, осуществляющие патологоанатомическое исследование лиц, предположительно погибших от гидрофобии (бешенства), должны быть оборудованы аптечкой, укомплектованной в соответствии с СП 1.3.1285-03 и дополненной антирабической вакциной и антирабическим иммуноглобулином.

В случае возникшей аварийной ситуации, вызванной повреждением кожных покровов, проводится местная обработка раны дезинфектантами, а затем немедленно должен быть начат курс лечебно-профилактической иммунизации в соответствии с действующей "Инструкцией по применению вакцины антирабической культуральной концентрированной очищенной инактивированной сухой, лиофилизата для приготовления раствора для внутримышечного введения и антирабического иммуноглобулина".

8.3. Режимы обеззараживания различных объектов (медицинских инструментов и др.) соблюдаются в соответствии с СП 1.3.1285-03.

8.4. Обеззараживание поверхностей помещения (пол, стены, двери), оборудования, рабочих столов и др. проводится двукратным протиранием с интервалом в 15 мин. 6%-ным раствором перекиси водорода либо любым дезинфицирующим средством, обладающим вирулицидной активностью, с последующей обработкой ультрафиолетом в течение 60 мин.

8.5. Каждая нештатная ситуация (авария) регистрируется в журнале аварийных ситуаций, где отмечается: дата, время, место, характер аварии, локализация травмы или контакт, фамилия, имя и отчество лиц, имевших контакт с вирусом уличного бешенства.

Приложение
(обязательное)

СПОСОБЫ ВЗЯТИЯ, УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ СЕКЦИОННОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ БЕШЕНСТВА

---------------------------------------------------------------------------
¦                           Секционный материал                           ¦
+-----------------+-------------------------------------------------------+
¦Сбор материала   ¦В качестве секционного материала используются ткани    ¦
¦                 ¦мозга: аммонов рог, мозжечок, кора больших полушарий;  ¦
¦                 ¦слюнные железы. Секционный материал собирают в одно-   ¦
¦                 ¦разовые полипропиленовые флаконы (колбы, контейнеры)   ¦
¦                 ¦с завинчивающимися крышками объемом 50 - 100 мл        ¦
+-----------------+-------------------------------------------------------+
¦Условия хранения ¦При температуре минус (65 +/- 5) °C (или в жидком      ¦
¦материала        ¦азоте) - длительно.                                    ¦
¦                 ¦При температуре минус (20 +/- 4) °C - 30 суток.        ¦
¦                 ¦При температуре (6 +/- 2) °C - не более 3 суток с      ¦
¦                 ¦момента отбора материала.                              ¦
¦                 ¦Допускается только однократное замораживание-оттаивание¦
¦                 ¦материала.                                             ¦
¦                 ¦Не допускается хранение материала в формалине и        ¦
¦                 ¦парафиновых блоках                                     ¦
+-----------------+-------------------------------------------------------+
¦Условия          ¦В термоконтейнере с охлаждающими элементами или в      ¦
¦транспортирования¦термосе со льдом при температуре:                      ¦
¦материала        ¦- (6 +/- 2) °C - не более 1 суток;                     ¦
¦                 ¦- минус (20 +/- 4) °C - не более 7 суток;              ¦
¦                 ¦- минус (65 +/- 5) °C (или в жидком азоте) - длительно ¦
------------------+--------------------------------------------------------

Комментарии
Комментирование через социальные сервисы Facebook и Вконтакте: